用具有這類特點(diǎn)的單獨(dú)雜交瘤細(xì)胞塑造成體細(xì)胞群,可制取對(duì)于一種抗原表位的特異性抗原即單克隆抗體。
單克隆抗體界定
單克隆抗體是人力制取的雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)的,雜交瘤細(xì)胞是由一個(gè)經(jīng)抗原體激話后的B體細(xì)胞與一個(gè)骨髓瘤細(xì)胞結(jié)合產(chǎn)生。單克隆抗體優(yōu)勢(shì):純凈度高,敏感度高,特異性強(qiáng),交叉式反映少,制取的低成本。缺陷:對(duì)技術(shù)性有一定的規(guī)定,并且根據(jù)抗原體的有機(jī)化學(xué)解決非常容易遺失表位。
單克隆抗體制取全過程
1.免疫力小動(dòng)物免疫力小動(dòng)物是用目地抗原體免疫力小白鼠,使小白鼠造成過敏反應(yīng)B淋巴細(xì)胞的全過程。一般采用6-8周齡雌蟲BALB/c小白鼠,依照事先制訂的免疫力計(jì)劃方案開展免疫力注射。抗原體根據(jù)血液循環(huán)系統(tǒng)或血循環(huán)進(jìn)到頸靜脈免疫器官,刺激性相對(duì)B淋巴細(xì)胞復(fù)制,使其活性、繁衍,并分裂變成過敏反應(yīng)B淋巴細(xì)胞。
2.細(xì)胞融合選用二氧化碳汽體處決小白鼠,無菌操作原則取下肝臟,在平皿內(nèi)擠壓成型碾磨,制取脾體細(xì)胞懸液。將準(zhǔn)備好的同系骨髓瘤細(xì)胞與小白鼠脾體細(xì)胞按一定占比混和,并添加促結(jié)合劑聚乙二醇。在聚乙二醇功效下,各種各樣網(wǎng)織紅細(xì)胞可與骨髓瘤細(xì)胞產(chǎn)生結(jié)合,產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞。
可選擇性塑造的目地是挑選結(jié)合的雜交瘤細(xì)胞,一般選用HAT可選擇性培養(yǎng)液。在HAT培養(yǎng)液中,未結(jié)合的骨髓瘤細(xì)胞因欠缺次黃嘌呤-鳥嘌呤-硫酸銨核糖轉(zhuǎn)移酶,不可以運(yùn)用挽救方式生成DNA而身亡。未結(jié)合的網(wǎng)織紅細(xì)胞雖具備次黃嘌呤-鳥嘌呤-硫酸銨核糖轉(zhuǎn)移酶,但其自身不可以在身體之外長期性生存也慢慢身亡。僅有結(jié)合的雜交瘤細(xì)胞因?yàn)閺钠Ⅲw細(xì)胞得到了次黃嘌呤-鳥嘌呤-硫酸銨核糖轉(zhuǎn)移酶,并具備骨髓瘤細(xì)胞能無盡繁衍的特點(diǎn),因而能在HAT培養(yǎng)液中生存和繁衍。