由于近年來艾滋病的蔓延，過去常用的被動轉(zhuǎn)移試驗現(xiàn)已很少在臨床上使用，目前體外特異性試驗主要采用血清學(xué)或細胞學(xué)免疫方法進行檢測，其最大優(yōu)點是安全，但多數(shù)體外的免疫學(xué)檢測需要特殊的精密設(shè)備，操作亦較復(fù)雜，敏感性也不如體內(nèi)試驗，故目前體外特異性試驗主要用于臨床科研，主要有以下幾種方法：

　　1.血清學(xué)試驗 血清免疫球蛋白G主要測定病人血清中針對致敏花粉的特異性IgG等抗體。常用檢查方法有放射變應(yīng)原吸附試驗(RAST)、放射免疫吸附試驗(RIST)、酶聯(lián)免疫吸附試驗 (ELISA)和點免疫結(jié)合試驗等。

　　血清免疫球蛋白E主要測定病人血清中針對致敏花粉的特異性IgE等抗體。常用檢查方法有放射變應(yīng)原吸附試驗(RAST)、放射免疫吸附試驗(RIST)、酶聯(lián)免疫吸附試驗 (ELISA)和點免疫結(jié)合試驗等。

　　2.細胞免疫學(xué)檢查 主要檢測手段是檢測針對致敏花粉的特異性T淋巴細胞、嗜堿粒細胞脫顆粒試驗(basophillc degranulation test)等。

　　根據(jù)花粉變應(yīng)性哮喘的臨床特征，結(jié)合當(dāng)?shù)氐拇髿庵兄旅艋ǚ埏h散的時間，診斷并不困難，但要明確致敏花粉的種類則需要借助試驗室的特異性檢查。特異性檢查包括體內(nèi)試驗和體外試驗兩大類，兩者各有利弊。通常體內(nèi)試驗敏感性高、操作方便、簡單易行，但易受患者用藥的影響和可能引起過敏反應(yīng)。體外試驗敏感性稍差、操作復(fù)雜費時且需要特殊設(shè)備，但由于是體外試驗，故絕對安全。目前國內(nèi)臨床上以體內(nèi)試驗應(yīng)用較為廣泛，而體外試驗多用于進行臨床科研。

　　1.皮膚點刺試驗 特異性皮膚試驗是英國醫(yī)生Blackley于1867年首先應(yīng)用于花粉癥的診斷的，其在臨床使用有130余年的歷史，仍是目前臨床廣泛應(yīng)用的特異性檢測方法。通常將花粉變應(yīng)原浸液以1∶1000(w/v)的濃度進行稀釋后進行皮膚點刺試驗(Prick test)或皮內(nèi)試驗(Intradermal test)。皮膚點刺試驗的具體方法是將稀釋的花粉浸液滴于皮膚上，然后用點刺針刺入附有花粉浸液的皮膚上，將表面輕輕挑破即可。皮內(nèi)方法是借助1ml注射器用4號針頭將稀釋的花粉浸液0.01～0.02ml注入皮內(nèi)即可。2種方法均在試驗后15～20min根據(jù)紅潤反應(yīng)和皮丘大小來判斷結(jié)果。目前國外以皮膚點刺試驗應(yīng)用較為普遍，國內(nèi)目前則以皮內(nèi)試驗法為主。兩種方法均方便易行，既適合于臨床上確定花粉過敏性哮喘病人對花粉過敏的種類，也適合于該病的流行病學(xué)調(diào)查。目前臨床上多根據(jù)季節(jié)將花粉進行分組，采用多價花粉浸液來進行皮膚試驗，如早春花粉、晚春花粉、夏季花粉和秋季花粉，每季花粉由3～5種同季的主要致敏花粉組成，但這種根據(jù)季節(jié)分組的花粉往往難以具體確定致敏花粉的種類，故準確性較差，有時可出現(xiàn)假陽性或假陰性，如果遇到上述可疑情況時可采用單一花粉浸液進行皮膚試驗以明確診斷。

　　2.支氣管激發(fā)試驗(bronchial provocative test) 這是一種模擬花粉變應(yīng)性哮喘發(fā)作的試驗方法，所得結(jié)果較為可靠，當(dāng)特異性皮膚試驗的結(jié)果難以判定時，該試驗方法可以取得較為可靠的結(jié)果，通常根據(jù)病人吸入花粉變應(yīng)原浸液的濃度或數(shù)量后的肺通氣指標的變化來判斷結(jié)果。該方法可信性強、重復(fù)性好，可準確反映氣道對某種花粉的反應(yīng)性和敏感性。該方法的缺點是如果吸入花粉浸液的濃度過高或劑量過大可能誘發(fā)哮喘發(fā)作。

　　3.鼻黏膜激發(fā)試驗(nasal mucous provocative test) 由于鼻黏膜與支氣管黏膜同屬呼吸道黏膜上皮，該試驗的結(jié)果通常也可較準確地反映支氣管的對花粉的敏感程度。與支氣管激發(fā)試驗相比，既安全又簡便，為臨床常用的試驗方法之一。具體方法是將浸有花粉浸液原液的標準大小濾紙放于一側(cè)鼻黏膜上，也可采用定量噴霧器噴入一側(cè)鼻腔內(nèi)定量的花粉浸液，另一側(cè)鼻腔作為空白對照。在15min左右觀察結(jié)果，病人出現(xiàn)鼻癢、噴嚏、流清涕、鼻塞、鼻黏膜蒼白、水腫等癥狀體征時判定為陽性結(jié)果，并可根據(jù)噴嚏的多少、清涕的數(shù)量、鼻通氣程度、有無喘息癥狀或全身癥狀判定陽性結(jié)果程度，通常局部反應(yīng)可分為 ， ， ，伴哮喘癥狀或全身反應(yīng)時可判為 。如果15min無反應(yīng)，還應(yīng)在4～7h觀察有無遲發(fā)性反應(yīng)，如果仍無反應(yīng)即可判定為陰性結(jié)果。為了避免判斷錯誤，通常應(yīng)先進行空白對照試驗，如果10min沒有反應(yīng)，則可在另一側(cè)鼻腔進行花粉激發(fā)試驗，如果空白對照試驗陽性，可以改用其他試驗方法。

　　4.眼結(jié)膜激發(fā)試驗(conjunctival test) 將花粉浸液稀釋后滴在眼結(jié)膜上，觀察有無眼癢，流淚和充血等陽性表現(xiàn)。眼結(jié)膜激發(fā)試驗結(jié)果可信度雖然比鼻黏膜激發(fā)試驗稍差，但比特異性皮試可靠的多。眼結(jié)膜試驗的優(yōu)點是安全性較大，發(fā)生嚴重過敏反應(yīng)時可通過沖洗將變應(yīng)原清除。