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血清乳酸脫氫酶-檢查項目-大眾養生網

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血清乳酸脫氫酶

基本信息

  • 專科分類: 心血管
  • 檢查分類: 生化檢查
  • 適用性別: 男女均適用
  • 是否空腹:  空腹
  • 手術參考價: 10元
  • 科 室: 心血管

血清乳酸脫氫酶檢查簡介

乳酸脫氫酶(LDH或LD)是糖無氧酵解及糖異生的重要酶系之一,可催化丙酮酸與L-乳酸之間的還原與氧化反應,也可催化相關的α-酮酸。LDH廣泛存在于人體組織中,以心、腎、骨骼肌含量最高,肝、脾、胰和肺組織次之。LDH測定方法主要有比色法和連續監測法。

血清乳酸脫氫酶檢查過程

取材:血液

原理:

(1)比色法:LDH以NAD+作氫的受體,催化乳酸脫氫,生成丙酮酸,后者與2,4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸二硝基苯腙,在堿性溶液呈紅色,根據顏色深淺求出酶活性。

(2)連續監測法:LDH可催化L-乳酸生成丙酮酸,同時NAD+還原成NADH,在340nm處吸光度的增高速率與酶活力成正比。

試劑:

(1)比色法:

①底物緩沖液(含0.3mol/L乳酸鋰,pH8.8):取乳酸鋰2.88g,二乙醇胺2.1g,加蒸餾水約80ml溶解,以1mol/LHCl調pH8.8,加水至100ml。

②11.3mmol/L輔酶Ⅰ(NAD)溶液:稱氧化型輔酶Ⅰ15mg,溶于20ml蒸餾水中,冰箱保存可用2周。

③1mmol/L2,4-二硝基苯肼(DNPH)溶液:稱取DNPH200mg,加10mol/LHCl100ml,溶后加水至1000ml,置棕色瓶內室溫保存。

④0.4mol/LNaOH溶液。

⑤1mmol/L丙酮酸標準液:稱取丙酮酸鈉(AR級)11.0mg,以底物緩沖液溶解并稀釋至100ml,臨用前配制。

(2)連續監測法:

①55mmol/L乳酸鋰Tris緩沖液:稱取乳酸鋰5.28g,Tris6.68g,溶于800ml蒸餾水中,在37℃水浴箱中用1mol/LHCl調pH至8.9(約需46ml),加水至1000ml,冰箱保存。

②12mmol/LNAD溶液:稱取NAD79.6mg,溶于10ml蒸餾水中,冰箱保存可用2周。

③基質應用液(含NAD6mmol/L):根據當天用量將上述NAD溶液和乳酸鉀Tris緩沖液等量混合即可。商品試劑盒按其說明溶解,恢復至室溫25℃使用。

操作方法:

(1)比色法:按表1操作。

混勻,室溫放置5min后,在440nm波長,比色杯光徑1.0cm,蒸餾水調零點,讀取各管吸光度,以AU-AC之差值查標準曲線,求出LDH活力單位。

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