三級甲等綜合醫院國營
北京協和醫院是集醫療、教學、科研于一體的現代化綜合三級甲等醫院,是國家衛生健康委指定的全國疑難重癥診治指導中心,最早承擔高干保健和外賓醫療任務的醫院之一,也是高等醫學教育和住院醫師規范化培訓國家 級
(1)二乙酰-肟法:
①尿素不能直接與二乙酰-肟反應,加入二乙酰-肟和強酸的目的是生成能與之反應二乙酰。加入Fe3+(或Cd2+)是為消除反應過程中生成的羥胺的干擾,硫氨脲可使反應的敏感度提高20倍。以前許多書刊介紹的方法是將二乙酰-肟與硫氨脲配在一起。但兩者可生成針狀黃色物質,用硫氨脲配在酸試劑中克服了這一缺點。
②酸濃度與吸光度呈正相關,故酸濃度要準確。所用試管口徑,放入沸水中的傾斜角度要盡量一致,水液面要在試管內液面之上,煮沸時間以放入試管重新沸騰計。最好每次測定標準和質控。觀察尿素動態變化時,應囑患者恒定食入蛋白,并空腹采血。樣本不能立即分析時,可提取血清(或血漿)于密封樣杯中,置4℃存放可穩定7天。結果大于20mmol/L時,樣本改為10μl,結果乘以2。
③此法雖然加入硫氨脲和鎘離子,在一定程度上增進了顯色強度和色澤穩定性,但仍有褪色現象(每小時約5%),所以,煮沸加熱顯色冷卻后,應及時比色。
④所用20μl加樣器務必校正無誤后方可使用。
⑤血漿(清)中尿酸、肌酐、氨基酸等含氮物對本試驗無干擾,溶血可能結果偏高,黃疸可能結果偏低。
⑥血漿(清)尿素含量與進食的蛋白質含量有密切的關系。在高蛋白飲食時,血漿(清)中的尿素含量可明顯升高,而低蛋白飲食時,則含量顯著降低。
(2)酶偶聯速率法:
①該法最常出現的問題是試劑失效或反應系統被污染。試劑中最不穩定的是NADH和谷氨酸脫氫酶。在分析過程中應注意以下幾個方面:如用血漿則不能用含氟化合物或NH4+的抗凝劑,前者可抑制尿素酶活性,后者則可參與反應。
②試劑空白吸光度應大于1.2A,否則說明NADH被氧化。同種試劑、儀器,在分析條件不變的情況下,測定得F值應相對恒定,否則說明試劑失效。
③復溶試劑勿振動,以免酶變性失活。必須用無氨水復溶試劑。試劑杯、樣品杯、反應杯要無氨、潔凈、無酸堿污染,應每次定標,并跟測質控血清。
一般無禁忌人群。
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