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熱鹽水試驗-檢查項目-大眾養生網

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熱鹽水試驗

基本信息

  • 專科分類： 心血管
  • 檢查分類： 血液檢查
  • 適用性別： 男女均適用
  • 是否空腹： 　空腹
  • 手術參考價： 25元
  • 科　室： 心血管

熱鹽水試驗檢查簡介

熱鹽水試驗是利用熱鹽水對血細胞進行檢查，用于檢查細胞核溶解情況。

熱鹽水試驗檢查過程

1.樣本處理

a.組織勻漿：稱取100~200mg新鮮組織如肝臟、腦、心肌等，PBS或生理鹽水沖洗，洗凈血水，濾紙吸干，用剪刀剪為碎塊放入小容量玻璃勻漿器內。加入1.0mL預冷的LysisBuffer，再加入50ulReagentA，0℃冰浴中上下研磨組織20次;有未研磨開的組織，可用雙層紗布過濾。

b.培養細胞勻漿：消化細胞，PBS洗滌，800×g5~10min離心收集細胞。計數。每次提取需要5×107個細胞，加入1.0mL冰預冷的LysisBuffer重懸細胞，再加入50ulReagentA，將細胞懸液轉移到小容量玻璃勻漿器內，0℃冰浴研磨細胞20~30次。

2.將組織或細胞勻漿物轉移到1.5ml離心管中，4℃，700×g離心5min。細胞核沉淀在收集管底部，棄上清。加入0.5mL冰預冷的LysisBuffer重懸沉淀;

3.取另一新離心管內加入0.5mLMediumBuffer，吸取上一步的重懸液，沿管壁小心地加入到此離心管中,置于MediumBuffer之上,4℃，700×g離心5min。將上清轉移到新離心管，細胞核沉淀在管底;

5.棄上清，在細胞核沉淀中加入0.5mLLysisBuffer重懸細胞核沉，1000×g離心10min，棄上清，得較純的細胞核沉淀;

6.用50-100μLStoreBuffer或合適的反應緩沖液重懸細胞核沉淀，立即使用或-70℃保存。

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