甲狀腺激素測定：一般的實驗室檢查對確定結節性甲狀腺腫并無多大幫助，因為甲狀腺激素水平通常是正常的，所以不能作為標志。但都應進行甲狀腺功能檢查，如T3、T4、FT3、FT4、TSH、PBI及血清甲狀腺球蛋白等。某些惡性甲狀腺結節患者其甲狀腺功能可有改變，晚期多有甲狀腺功能低下。某些良性病變的甲狀腺球蛋白水平可以升高，如Graves病、非毒性甲狀腺腫、橋本病或亞急性甲狀腺炎等。對于甲狀腺結節來說，測定甲狀腺球蛋白也無多大評價。但是如果是自主性功能性的毒性腺瘤，其甲狀腺功能水平可以升高，出現甲亢癥狀。TRH興奮試驗，其TSH水平對TRH無反應。
1.甲狀腺B超 臨床上檢查甲狀腺B超可以明確甲狀腺結節為實質性或囊腫性，診斷率達95%。伴有囊腫的甲狀腺結節多為良性結節，可用抽吸治愈或縮小結節。實質性結節者還應進行甲狀腺掃描或穿刺病理檢查等。具有高分辨力的超聲圖像檢查可以分析結節至1mm病灶，臨床上認為單結節者，常可發現為多結節，接近于尸檢所見，大多數囊腫病變并非真正囊性，而是具有實性組織的病變，并能顯示混合性回聲波群。
2.放射性核素顯像檢查 常用的甲狀腺掃描有核素131Ⅰ和99mTc即131碘掃描99锝掃描。甲狀腺結節對碘的攝取能力不同，圖像不同而分類，99mTc可象碘一樣被甲狀腺所攝取，但不能轉化。惡性結節不能攝取碘，惡變區將出現放射稀疏區，根據其攝碘能力，可分為無功能的冷結節，正常功能的溫結節和高功能的熱結節。放射性核素或99mTc掃描的缺點是不能完全區分良性或惡性結節，而僅是一初步判斷分析。有報告22例應用放射性核素掃描患者，不論其甲狀腺功能如何，全部進行手術治療，結果有冷結節占84%，溫結節10.5%，熱結節5.5%，其中16%的冷結節，9%的溫結節及4%的熱結節為惡性結節，因此，冷結節的惡性度最大，但其中多數仍為良性結節病變，熱結節的惡性度雖小，但其中也有惡性結節病變。近年來，還開展了應用75硒-硒蛋氨酸作為示蹤劑的甲狀腺正相掃描法，與正常甲狀腺組織比較，其惡性結節病變區內有更多的細胞分裂，更高的細胞密度，病灶處出現正相圖象。經131Ⅰ或99mTc掃描為冷結節者，又經75硒-硒蛋氨酸掃描呈正相顯影，其惡性結節病變可能性多為50%以上。應用Americium-241熒光掃描技術，可通過間接測量碘容量來鑒別良性結節與惡性結節，它比131Ⅰ和99mTc掃描更為敏感有效，但也出現假陽性。此外，目前還有用核磁共振，干板X線照相術，電子放射照片及溫度記錄器等檢查法，均有待進一步應用。
3.甲狀腺穿刺組織病理檢查 應用細針針吸活檢術檢查，對甲狀腺結節的診斷有一定價值，比較安全。穿刺結果有助于手術治療指征，其細胞學準確度達50%～97%。但也可取樣有誤，特別是有囊性變患者及結節較小者，如小于1cm的病變，穿刺準確度可有困難。細針活檢不能確定，還可用粗針再穿刺活檢，其結果可能更加準確。但穿刺針進入惡性結節癌腫以后，可將癌細胞擴散為其害處，應特別注意。為了術前明確結節性質，也可采用開放性甲狀腺組織活檢，以利全面分析。
