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糖鏈抗原242-檢查項目-大眾養(yǎng)生網(wǎng)

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糖鏈抗原242

基本信息

  • 專科分類： 腫瘤科
  • 檢查分類： 免疫檢查
  • 適用性別： 男女均適用
  • 是否空腹： 　空腹
  • 手術(shù)參考價： 25元
  • 科　室： 腫瘤科

糖鏈抗原242檢查簡介

糖類抗原CA242(CA242)是從人結(jié)直腸癌細(xì)胞系COLO205單克隆抗體發(fā)現(xiàn)的，也是一種唾液酸化的鞘糖脂抗原，和CA50共同表達(dá)。其生化本質(zhì)為唾液酸化的糖類結(jié)構(gòu)，屬于粘蛋白。在正常胰腺、結(jié)腸粘膜中存在，但表達(dá)極低。

糖鏈抗原242檢查過程

操作方法：本法分三個步驟，即抗原與抗體反應(yīng)、B和F分離和放射性測定。

（1）抗原與抗體反應(yīng)：將標(biāo)本（非標(biāo)記抗原）、標(biāo)記抗原和抗血清順序定量加入小試管內(nèi)，置室溫（15～30℃）作用24h，使其充分競爭結(jié)合。

（2）B、F分離：分離技術(shù)多種多樣，常用沉淀法。

①第二抗體沉淀法：又稱雙抗體法，在受檢抗原與第一抗體特異性反應(yīng)后加入相應(yīng)的第二抗體，使形成的抗原-第一抗體-第二抗體的復(fù)合物共沉，一經(jīng)離心即可使結(jié)合標(biāo)記抗原B與游離抗原F分離。本法是特異性沉淀，分離完全，非特異性結(jié)合力低。但第二抗體用量較大，成本較高。此外血清濃度、抗凝劑的有無因素可在一定程度上影響結(jié)果。

②聚乙二醇（PEG）沉淀法：使蛋白質(zhì)處于等電點(diǎn)狀態(tài)，水化層破壞而導(dǎo)致蛋白質(zhì)沉淀。本法優(yōu)點(diǎn)是PEG制備方便、價廉、分離快速，缺點(diǎn)是非特異沉淀物較多，分離不完全。

③第二抗體-聚乙二醇沉淀法：本法既有PEG法的快速沉淀優(yōu)點(diǎn)，且保持第二抗體特異性沉淀的作用，又減少第二抗體用量，并降低PEG濃度，使非特異沉淀物減少。

④活性炭吸附法：利用活性炭表面活性將小分子的游離部分吸附。如在活性炭表面涂上一層葡聚糖，使它表面具有一定孔徑的網(wǎng)眼，從而允許小分子游離抗原或半抗原逸入而被吸附，而大分子復(fù)合物則被排斥在外。在抗原與抗體反應(yīng)后，加入葡聚糖-活性炭，放置5～10min，使游離抗原吸附在活性炭顆粒上，離心使顆粒沉淀，上清液中含有結(jié)合的標(biāo)記抗原。

（3）放射性強(qiáng)度測定：B和F分離后，即可測定其放射性強(qiáng)度。測量儀器有兩類：液體閃爍計數(shù)儀（測β射線）和晶體閃爍計數(shù)儀（測γ射線）。計數(shù)單位是探測器輸出的電脈沖數(shù)，單位為cpm（脈沖數(shù)/min）。

每次測定均需作一標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，以標(biāo)準(zhǔn)抗原的不同濃度為橫坐標(biāo)，以測到的相應(yīng)放射性強(qiáng)度為縱坐標(biāo)作圖。放射性強(qiáng)度可任選B或F，亦可采用計算值B/B＋F、B/F或B/B0。標(biāo)本應(yīng)作雙份測定，取其平均值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的受檢抗原濃度。

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