三級甲等綜合醫(yī)院國營
北京協(xié)和醫(yī)院是集醫(yī)療、教學(xué)、科研于一體的現(xiàn)代化綜合三級甲等醫(yī)院,是國家衛(wèi)生健康委指定的全國疑難重癥診治指導(dǎo)中心,最早承擔(dān)高干保健和外賓醫(yī)療任務(wù)的醫(yī)院之一,也是高等醫(yī)學(xué)教育和住院醫(yī)師規(guī)范化培訓(xùn)國家 級
抗SS-B(La)抗體的測定原理:用間接免疫熒光法檢測時,抗SS-A/Ro、抗SS-B/La陽性結(jié)果表現(xiàn)為核的細斑點型免疫熒光,但抗SS-A/Ro引起的熒光亮度較弱。其操作與原理均與抗核抗體檢測相同。雙向免疫擴散法仍為抗SS-A/Ro、抗SS-B/La的常用檢測方法,但敏感性不高。目前常用免疫印跡法,其原理可參看抗Sm抗體測定。最近也有人用基因重組的52kD和60kD蛋白質(zhì)建立ELISA法測定抗SSA/Ro抗體,用重組48kD蛋白質(zhì)建立ELISA法測抗SS-A/La抗體,其敏感性較之免疫擴散法約高千倍,但因特異性問題(重組抗原中常含有細菌產(chǎn)物)未廣泛應(yīng)用。一種敏感性和特異性都很高的方法是放射免疫沉淀法,此法是用放射性36S-蛋氨酸或32P-正磷酸鹽標記組織培養(yǎng)細胞,標記上36S的代表所有蛋白質(zhì),標記上32P的代表磷酸化蛋白,此外,細胞內(nèi)RNAs也標記上32P。將待測血清與標記上放射性核素的組織細胞提取物混合,抗體與標記抗原反應(yīng),形成免疫復(fù)合物,用葡萄球菌A蛋白使免疫復(fù)合物沉淀,溶解后行SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳、放射自顯影,與自身抗體結(jié)合的放射性標記核抗原形成的條帶即可顯現(xiàn)出來,參照標準品形成的條帶進行分析,即可做出診斷。此法目前還只限于實驗室研究。
試劑:血清1ml
操作方法:使用的方法包括:
(1)沉淀法(免疫雙擴散,反相免疫電泳),常用胸腺提取物作基質(zhì)。
(2)免疫印跡法,在48×103處出現(xiàn)3條帶。
(3)ELISA,常用親和純化或重組抗原。
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