三級甲等綜合醫院國營
北京協和醫院是集醫療、教學、科研于一體的現代化綜合三級甲等醫院,是國家衛生健康委指定的全國疑難重癥診治指導中心,最早承擔高干保健和外賓醫療任務的醫院之一,也是高等醫學教育和住院醫師規范化培訓國家 級
(1)血清中LD在其底物存在下(血清中含有一定量的乳酸)也可還原NAD+為NADH,產生高空白值。本法中加入丙酮酸鈉,抑制LD活性,可有效地降低空白吸光度。
(2)反應混合物中各成分濃度為:
3α-HSD5U/L
黃遞酶500U/L
NAD+1mmol/L
NTB0.2g/L
pH7.50
(3)反應混合物的吸光度受蛋白質影響,故甘氨膽酸鈉標準液配制于混合血清中。混合血清中原有膽汁酸及其他可能參與反應的物質需設P管消去。
(4)3α-HSD制品中含有二硫蘇糖醇(di-thiothreitol,DTT),酶制劑用量過多時可影響NTB的還原。
(5)本法線性達250μmol/L。如血清膽汁酸超過此值應作適當稀釋。
(6)NoigenET-180是一種非離子表面活性劑,化學名為聚氧乙烯油醚(polyoxy-ethyleneolylether),為日本京都Dai-ichiKo-gyoSeiyaku公司產,加入反應混合物中可防止沉淀,不影響3α-HSD及黃遞酶活性,不影響本測定系統的敏感性。
(7)血清中的TBA含量較低,標本中含大量的干擾物質,其中最主要的是乳酸脫氫酶(LDH)。LDH能影響NAD+的還原反應,由LDH生成的NADH往往比由3α-HSD催化TBA參與的反應生成的NADH量要大的多。由于各類肝炎均可引起血清LDH升高,因此測定中必須消除LDH的影響,方法有:血清67℃加溫30min、加草酸作為LDH的封閉劑、堿或酸處理、或用丙酮酸鈉抑制LDH活性等,其中以丙酮酸鈉法最好。其它還原性物質的干擾通過設立雙試劑,樣品先和不加3α-HSD的體系孵育,使樣品中的干擾物質反應,然后加入3α-HSD,使TBA反應,可排除干擾。
不合宜人群:一般無不適合的人群。
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